近日，美國畫家羅恩·皮西尼羅宣稱“破解了一個隱藏500年的祕密”，在達芬奇的名畫《蒙娜麗莎》人物肖像的背景中，隱藏着獅子、猿猴和水牛，以及一隻可能是蛇或者鱷魚的動物的肖像系列。根據達芬奇筆記中“要讓她的心臟彷彿被一隻大蛇所噬咬”等表述，以及蒙娜麗莎手的姿勢等細節，羅恩賦予這幅畫作主題一個新的闡釋：嫉妒。這一觀點再次引起了藝術界對於這幅傳世經典畫作的關注與討論。
一直以來，達芬奇的這幅作品不僅僅因為其藝術成就而在國內外享有盛譽，還因為畫作中很多細節對人們來説都是“謎一樣的存在”而引人關注。
比如，畫中人物夢幻般的微笑，因其若有若無，時而哀傷憂鬱，時而恬靜温柔，被認為是“神祕的微笑”而被各方研究。
1993年，加拿大美術史家蘇珊·吉魯得出了“微笑的嘴脣”是一個男子脊背線條的結論，認為這反映出了畫家對人體壯美力量的呼喚。2000年，哈佛大學神經科專家指出，人們視覺系統的工作機理，帶來了對於微笑的不同感受。
2005年，盧浮宮公佈了荷蘭一所大學用“情感識別軟件”分析得出的人物表情成分比例：高興83%，厭惡9%，恐懼6%，憤怒2%。2009年，西班牙科學家通過神經學和光學分析，認為微笑的差異是視覺誤差所致。人們對此的研究一直在繼續，莫衷一是，並且有各種奇異怪誕的解釋。比如，還有研究認為她沒有門牙，所以笑不露齒，或者認為她有孕在身，因體悟生命的神祕而笑。
此外，關於畫作中符號及其象徵的意義，也是人們探索的問題之一。意大利國家文化遺產委員會去年宣稱，人物的右眼球上隱藏着黑色字母“LV”，是列奧納多·達芬奇姓名首字母的縮寫，但左眼的字母尚未探查清楚。
畫中拱橋上的72被認為可能是年份1472，或者是和用數字命理解讀《聖經》內容的“卡巴拉”有關，後者是一個探索造物主與宇宙奧祕之間關係的猶太經典。畫中人物左側更為突出的表現方式，被解讀為畫家對女性的崇拜。1503年，達芬奇開始對此畫的創作，但是，也許直到2503年，這幅畫作仍是一個難解的“達芬奇密碼”。
